原位雜交：
原位雜交是指用特定探針定位、檢測DNA、RNA的一種有效的實驗方法，通過把特點序列客隆到特殊載體上，通過轉錄酶反轉一條天然的RNA探針，將探針和切片樣品進行雜交，通過一系列顯色方法，來確定RNA或者DNA表達區域；本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標記，靈敏度和同位素相當。 我們采用roche標記及顯色試劑盒，GISH/ISH/FISH按照探針進行收費，每個試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片，收費為1萬5千元，GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費為1萬9千元。量大優惠！
DNA 探針為原位雜交提供較高的靈敏度。與RNA探針相比，DNA探針與靶mRNA 分子的雜交強度較弱，因此在雜交后的洗滌中不應使用甲醛。
探針特異性至關重要。如果已知細胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列，則可據此設計高度的互補探針。如果超過 5% 的堿基對不互補，那么探針只能與靶序列發生輕度雜交。這意味著，探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去，可能無法正確檢測。
同一樣本可以多次做原位雜交實驗嗎?
一般情況下，如果操作沒有得到理想的結果，是可以將探針洗滌然后進行再次的雜交的。如果使用的是直標型探針，還可以使用不同探針對同一樣本進行反復雜交。針對不同的樣本，處理方法略有不同。
原位雜交實操中哪些因素比較重要?
重要的因素：溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標DNA的雜交效率；光照影響著熒光染料的強度，所以探針要避光保存，其已經雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存；各種試劑pH也要達到要求，這也直接關系到原位雜交的穩定性。
掃一掃手機網站
在線客服
15002786799
81680037@qq.com